胰蛋白酶-Sevag法联用脱柿多糖蛋白
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摘要: 目的寻找柿多糖脱蛋白的适宜方法。方法通过正交实验找出酶法脱蛋白的最优条件,比较酶法、Sevag法、酶-Sevag联用法的脱蛋白效果和多糖保存率。结果柿多糖脱蛋白的最佳工艺为胰酶液(1mg/mL)和粗多糖液(50mg/mL)的比例为0.4∶1时,在37℃下恒温5h处理后,加0.2倍体积pH7.0的10%H2O2反应过夜,再加1/3体积氯仿-正丁醇溶液,充分混合20min,4000r/min离心5min,重复操作3次至两相界面不再出现蛋白沉淀,透析24h,得水提多糖精品,4℃保存,此时蛋白质含量为0.368mg/mL,多糖含量为86.9%,蛋白的脱除率为83.8%。结论酶-Sevag联用法蛋白脱除率和多糖保存率均较高,工艺简单,适宜于脱除柿多糖蛋白。