UPLC快速测定可溶性肽或蛋白中谷氨酰胺含量
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摘要: 建立了UPLC测定谷氨酰胺的方法。采用BTI(bis(trifluoroacetoxy)iodobenzene,BTI)衍生化肽或蛋白中非氮端的谷氨酰胺(Glutamine,Gln),衍生产物L-2,4-二氨基丁酸(L-2,4-Diaminobutyric acid,DABA)经2,4-二硝基氟苯(2,4-Dinitrofluorobenzene,DNFB)紫外显色后,用超高效液相色谱仪(UPLC)在355nm下进行检测测定。结果表明,DABA的最低检出限为0.2ng/mL,线性范围为1~10μg/mL。经Ala-Gln、β-乳球蛋白、α-乳清蛋白和溶菌酶四种蛋白标品检验,测得标样中Gln的回收率为93%±2%~98%±3%。所用方法具有检出限低、样品用量少、高效快速等特点。