过敏原小麦醇溶蛋白的ELISA定量检测方法的建立
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摘要: 建立了检测小麦过敏原醇溶蛋白的定量ELISA抗体夹心法,以2μg/mL的鼠抗醇溶蛋白单抗包被酶标板,HRP标记兔抗醇溶蛋白抗体作为酶标抗体,工作浓度为1∶8000,将醇溶蛋白精确配制成一定浓度的标准品,检测醇溶蛋白的含量。最佳的线性范围是19.53~5000ng/mL,R2≥0.99,定量检测限为19.53ng/mL,对应的食品样品检测限为7.81ppm。样品的回收率在93.57%~105.72%之间,实验内CV为3.07%~5.91%,实验间CV为0.26%~5.24%,仅对大麦有一定的交叉反应,可在4℃放置两周。本法准确度和精密度高,重复性和稳定性好,特异性较强,适用于食品过敏原小麦醇溶蛋白的检测。