酶法糖基化芦丁的高效液相色谱法测定
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摘要: 对酶法转化芦丁后的酶反应产物糖基化芦丁的高效液相色谱(HPLC)测定方法进行了研究。HPLC法的色谱条件为:色谱柱使用Agilent公司ZORBAX Eclipse XDB-C18(4·5mm×150mm,5μm);流动相为V(乙腈):V(超纯水):V(甲酸)=18:81·9:0·1;流动相流速为0·8mL/min;紫外检测波长为254nm;柱温30℃;进样量5μL。运用该方法,在7min之内可以完成样品糖基化芦丁的测定,并且在HPLC谱图上能将芦丁和葡萄糖基芦丁(转入1个葡萄糖单元)完全分离,从而保证测定的准确性。实验结果表明,利用HPLC方法测定糖基化芦丁不失为一种方便、快速、可靠的测定方法。