摘要: 目的:为了将胆固醇氧化酶应用于低胆固醇系列食品开发和胆固醇测定中,研究优化了菌株Rhodococcus SP.R14-2发酵生产胆固醇氧化酶（COX）的工艺条件。方法:通过测定比较COX酶活力,利用全自动发酵罐小试生产COX,研究发酵温度、pH、乳化剂、通风量和搅拌速率等因素对COX产量的影响。结果:Rhodococcus SP.R14-2的生物生长量和产酶是部分偶联的,胞外COX酶的合成高峰比生物量高峰滞后约12h。发酵过程中分段控制搅拌转速和通气量分别为:发酵前10h,200r/min和4L/min;10～50h,300r/min和5L/min;50h后,250r/min和4.5L/min,COX达到1.58U/mL的最高量。结论:发酵温度、培养基pH、通气量及搅拌速度等因素影响其生物量和COX酶合成,采用分段式控制,有利于COX产量的提高。